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明確樣本類型與采集時機
樣本類型選擇
豬瘟PCR抗體檢測主要采集血液樣本,一般選擇前腔靜脈采血或耳靜脈采血。前腔靜脈采血時,將豬保定好,在豬頸部腹側(cè),第一、二肋骨與胸骨柄結(jié)合處前方的凹陷處進針,針頭朝向?qū)?cè)肩關(guān)節(jié)方向刺入,見有回血即可采集血液。耳靜脈采血則相對簡單,拉住豬耳,使耳靜脈怒張,用針頭平行刺入耳靜脈,采集血液。
除了血液,也可采集唾液樣本,但唾液中抗體含量相對較低,檢測難度較大。采集唾液時,可使用棉繩或?qū)S猛僖翰杉?,將棉繩掛在豬欄上,讓豬啃咬,待棉繩濕潤后取下,擠出唾液到無菌容器中。
采集時機把握
應(yīng)在豬感染豬瘟病毒后的一定時間采集樣本,此時抗體水平較高,檢測準(zhǔn)確性更高。一般來說,豬感染豬瘟病毒后7 - 10天開始產(chǎn)生抗體,2 - 3周抗體水平達到高峰。因此,最好在豬出現(xiàn)疑似豬瘟癥狀后的2 - 3周采集樣本進行檢測。
做好采集前準(zhǔn)備工作
器材準(zhǔn)備
準(zhǔn)備一次性無菌采血針、真空采血管、棉球、碘伏、止血帶、無菌容器等器材。采血針和真空采血管要確保在有效期內(nèi)且包裝完好,避免使用過期或破損的器材。
對于唾液采集,要準(zhǔn)備好棉繩或?qū)S猛僖翰杉?,并確保其清潔無菌。
豬只保定
采血前要對豬只進行保定,防止豬只亂動導(dǎo)致采血失敗或人員受傷??梢允褂帽6芑蚶K索將豬只固定好,使其頭部和身體不能隨意晃動。保定過程中要注意動作輕柔,避免對豬只造成不必要的應(yīng)激。
規(guī)范采集操作流程
采血操作規(guī)范
采血部位要嚴(yán)格消毒,先用碘伏棉球由內(nèi)向外螺旋式消毒采血部位,消毒范圍直徑不小于5厘米,待碘伏干燥后再進行采血。采血時,針頭要快速刺入血管,避免反復(fù)穿刺,以免引起溶血或組織液混入血液,影響檢測結(jié)果。
采集血液時,要根據(jù)檢測需求控制采血量,一般采集3 - 5毫升即可。采血完成后,用棉球按壓采血部位,防止血液滲出。
唾液采集操作規(guī)范
唾液采集前要讓豬只禁食一段時間,一般禁食2 - 3小時,以減少食物殘渣對唾液的影響。采集過程中,要確保棉繩或采集器不被污染,避免引入其他病原體或雜質(zhì)。采集到的唾液要及時轉(zhuǎn)移到無菌容器中,并盡快送檢。
樣本保存與運輸注意事項
樣本保存
采集到的血液樣本應(yīng)盡快離心分離血清,將血清轉(zhuǎn)移到新的無菌離心管中,密封保存。如果不能及時檢測,可將血清置于2 - 8℃冰箱中短期保存(不超過3天),長期保存應(yīng)置于-20℃或-80℃冰箱中。
唾液樣本采集后應(yīng)立即冷藏保存,在2 - 8℃條件下可保存24 - 48小時,如需長期保存,也應(yīng)置于-20℃或-80℃冰箱中。
樣本運輸
樣本運輸過程中要使用冷藏箱或冰袋,保持樣本的低溫狀態(tài)。運輸時間不宜過長,盡量在24小時內(nèi)將樣本送達檢測實驗室。同時,要做好樣本的標(biāo)識和記錄,包括樣本編號、豬只信息、采集時間等,以便檢測人員準(zhǔn)確識別和處理。
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